花的组织培养方法(花的组织培养方法有哪些)
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接要: 如果您正在寻找花的组织培养方法那么本文刚好为大家整理了各方的说法,同时还有花的组织培养方法有哪些可以一起阅读,希望能够帮到您。本文目录一览:1、月季的组织培养法...
如果您正在寻找花的组织培养方法那么本文刚好为大家整理了各方的说法,同时还有花的组织培养方法有哪些可以一起阅读,希望能够帮到您。
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3、组织培养法是怎样繁殖花苗的?
月季的组织培养法是怎样的?
用组织培养的方式进行繁殖,其繁殖率远远高于其他无性繁殖的手段,所得的新苗不仅可以保留原品种的优良性状,而且能得到无病毒感染的植株。所用的时间比播种苗、扦插或嫁接苗均短,在良好的条件下,经过2个月的组织培养苗,春季下地栽种当年即可见花。
月季的组织培养繁殖在国内外已有不少报道,目前这一快速繁殖方法已基本完善,在一些地方已经用于工业化生产,对加速老品种更新换代,迅速普及名优品种起到了很大作用。在培养程序上基本相同如图4,但在不同条件下,可以有一定程度的灵活性。
图4 月季组织培养流程图
1.培养基的配制
在开始组织培养时,首先要配制培养基。目前最常用的月季培养基是MS培养基,其配方列于表4。
表4 MS培养基配方
MS培养基母液的配制:为了更方便地配制培养基,要先配制比所需浓度高10~100倍的母液如表5,并用家用冰箱在0℃左右贮存备用。母液要按无机成分分别配制,以免发生化学反应或沉淀。
表5 MS培养基母液的配制
MS培养基的配制:先在洁净的不锈钢锅里放入约750毫升蒸馏水,加入所需要的琼脂和糖,最好先在水浴锅里将琼脂溶化,如果直接加热,应不停地搅拌,防止锅底烧焦或沸腾溢出。然后加入表5中的母液Ⅰ50毫升,母液Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ各5毫升,加蒸馏水将体积调到1升。充分混合好后,用氢氧化钾或氢氧化钠将溶液pH调到5.8左右。至此培养基的配置已算完成。
分装消毒:将培养基分别注入试管或三角瓶内,深度为全深的1/3或1/4即可。然后加盖或用棉塞塞紧。将试管或三角瓶平摆在高压锅内,在压力202.65千帕(2个大气压),温度120℃下灭菌15~20分钟即可。灭菌后取出放至室温即可使用。做好的培养基一般应在2周内用完,短时间可存放于室温条件,如不能尽快用完,应存放于4℃条件下,如果培养基表面变干,就不能再用。
2.无菌培养的建立
(1)植物组织材料选取与消毒
首先从生长在田间的或盆栽的优良品种植株上,选取生长健壮的当年枝条,采回后切去叶,再剥去附在茎上的叶柄及皮刺,先整段用洗手刷蘸浓洗衣粉水仔细刷洗,再用自来水冲净,毛巾擦干,置小木板上,用利刀切成2~3厘米一段,每段至少有一个侧芽。然后在超净工作台或接种箱内,用饱和漂白粉上清液,作表面灭菌15~30分钟。然后倾去灭菌溶液,用无菌水刷洗数次(无菌水是用1000毫升的大三角瓶,盛放2/3体积的自来水,经半小时的高压灭菌后放凉即可。无菌水存放时间不宜过长,以1~2周较好,时间长了要重新高压灭菌)。
(2)接种与培养
接种就是把植物材料插入培养基的过程,要注意严格执行无菌操作。将洗涤好的月季茎段用无菌纱布吸干外表水分,用灼烧过的镊子夹一块茎段送入装有培养基的管内,轻轻插在培养基上,再塞上高压灭菌过的棉塞。将接种好的试管放在培养室内培养,温度以21℃左右较好,光照10~12小时,光强800~1200勒克斯,从芽萌发到长到1厘米左右约需2~3周。
(3)继代增殖培养
将上面已经长大的月季嫩茎切成1~2节一段,投入新鲜的增殖培养基上。增殖培养基可直接用MS培养基,也可在MS培养基中加入细胞分裂素BA和吲哚乙酸IAA。用量是每升培养基加1~2毫克BA,加0.1毫克IAA。月季小苗经5~6周1次的继代增殖,会按几何级数增殖起来。
(4)壮苗培养
继代增殖的小苗嫩茎很细弱,要进行一次壮苗培养,以取得适合生根和以后移栽的苗子。壮苗培养基是在MS培养基中加入细胞分裂素BA0.3~0.5毫克/升,加入吲哚乙酸IAA0.01~0.1毫克/升。将月季嫩茎投入壮苗培养基后,控制光照10~12小时/天,光强800~2000勒克斯,温度21℃左右。
(5)生根与移栽
经过壮苗培养的月季嫩茎长到一定长度时,就应切割下来,转入生根培养基。生根培养基是将MS培养基稀释1倍,再加入吲哚乙酸IAA1.0毫克/升或吲哚丁酸IBA0.5毫克/升,再加入活性炭300毫克/升和白糖30克/升。切下的月季嫩茎长度以2~3厘米为宜。经3周培养,就有数条白根生成,这时就可出瓶移栽。第一次移栽是把幼苗取出,先洗去沾附的琼脂培养基,再种植到蛭石或锯木屑+园土(1∶1)的介质中,其他类似介质也可视情况选用,但要疏松通气,有一定的保水、保肥能力。种植密度每株2~3厘米×4~6厘米。移栽完毕浇透水,用0.1%百菌清、多菌灵或托布津等喷雾保苗。保持相对湿度85%以上。移栽1周后,可施稀薄的追肥。视苗大小,浓度逐渐由0.1%提高到0.3%左右,施肥种类可用复合肥、尿素、磷酸二氢钾以及饼肥水等等。通常7~10天喷一次杀菌剂保苗。在4~6周后,进行第二次移栽,通常植入5厘米×9厘米的塑料杯或营养钵中,每杯种1苗,加强水、肥和病虫害管理防治,经4~6周,地上地下部分都充分生长,有些植株可能开花,此时可上盆或定植。
郁金香的组织培养方法的主要步骤有哪些?
1. 选择外植体与接种 选择良好外植体是组织培养能否顺利成功的第一个关键。要选择生长健壮,无病虫侵害,发育良好的鳞茎,并用清水冲洗干净,表皮上的杂物可用中性肥皂搓洗。然后,用无菌水冲洗数次,放入70%酒精中消毒 30分钟,再经0.1%升汞浴液消毒 5~3 0分钟(时间因品种而异)。取出后,用无菌水冲洗,再经过切块,然后接种到培养基上,放入培养间。培养基以MS培养基为基础。接种需要无菌环境,并要迅速、准确。
2. 接种后管理 接种后培养间温度应保持在15~20℃之间,光照强度在自然散射光线的情况下增加1000勒克斯的日光灯照。大约 10~15天后,外植体开始膨大,25~30天形成愈伤组织,80~90天幼芽开始分化,150~180天形成独立小苗,240天可形成有空心茎的小苗。在这个管理过程中,每30天左右要转移一次,以免老化。根据试验结果说明,如果在培养基中加入活性炭,并在黑暗条件下培养,效果更加明显,它在3个月后可直接形成子鳞茎,可缩短成花的时间,但繁殖系数要较正常的低。
3. 小苗的移植培养 小苗有了空心茎后,就需要及时移栽到苗床上。苗床的栽植土要求疏松透气,并有一定的保水、保肥能力,必须经过消毒。苗床外的温室环境必须有一定的遮阳设备,冬天需要加温设备,夏天需要降水系统。苗刚移植前需要2~3天锻炼,打开培养瓶盖,让其逐步的与外界环境适应。锻炼后,取出小苗,洗去培养基,移栽入苗床,细雾浇水,注意茎部不沾土壤,免受感染。前期要注意遮阳,并控制浇水量,随着小苗长大,减少遮阳时间,适当加大浇水量,并开始施加稀薄液肥。当小苗根子较茁壮时,已具有较强的抗逆能力,可以考虑移植了。
这里需要强调的是,温度对郁金香的组织培养有着决定性的影响。不同的品种,适宜的培养温度是不同的。适宜A品种的温度,放在B品种上,可能会形不成不定芽。据试验表明,温度的变化,引起培养基内生长素和激动素的浓度差异,从而影响愈伤组织不定芽的形成。因此,对郁金香进行组织培养时,要根据品种来确定最合适的培养温度,能够事半功倍,提高培养的成功率。
组织培养法是怎样繁殖花苗的?
快速大量繁殖花苗:用组培法繁殖花苗主要是利用茎尖、叶片等进行新植株的培育。
采用的主要方法,一是通过茎尖培养产生大量芽丛。如菊花、唐菖蒲等在几毫米大的茎尖上含有许多叶芽,经过1~2个月组培,即可长出一个芽丛;将此芽丛取下,再用组培法培养,即可繁殖出大量新株。
二是通过叶片培养,直接诱导产生不定芽,如采取倒挂金钟、非洲紫罗兰等一部分叶片进行组培,经过1个多月培养,即可得到大量芽,从而获得新植株。
盆栽花卉组织培养技术流程有哪些?
(1)外植体的选择 常用的外植体有两类,一类是带芽的外植体,如茎尖、侧芽、鳞芽、原球茎等,一类根、茎、叶等营养器官和花药、花瓣、花轴、花萼、胚珠、果实等生殖器官。其中最常用的外植体是茎尖,通常切块在0.5厘米左右,培养脱毒种苗,常用茎尖分生组织部,长度为0.1毫米以下。
(2)外植体的灭菌 常用的消毒剂有次氯酸钙、升汞、次氯酸钠、双氧水、70%酒精等。
(3)外植体接种 外植体接种需在无菌条件下进行。工作人员应穿工作服,戴口罩,用70%酒精擦手,超净工作台上要用70%酒精擦净。接种用的剪刀、镊子和器皿都要求无菌。接种后的培养容器置培养室,室温应控制在23~26℃,每天12~16小时光照,光照度为1000~3000勒克斯。
高空压条(4)诱导侧芽、不定芽或胚状体 常用的基本培养基为MS培养基。激素的种类和浓度对外植体的分化和增殖起着重要的作用,不同的花卉对激素的种类和浓度要求有差异。
(5)诱导生根 继代培养形成的不定芽和侧芽等一般没有根,要促使试管苗生根,须转移到生根培养基上,生根培养基一般应用1/2MS培养基,因为降低无机盐浓度有利于根的分化。不同盆栽花卉诱导生根时所需要的生长素的种类和浓度不同,一般常用吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)和吲哚丁酸(IBA)三种。
(6)炼苗 首先打开试管瓶塞,放阳光充足处让其锻炼1~2天,然后取出幼苗,用温水将琼脂冲洗掉,移栽到泥炭、珍珠岩、蛭石、砻糠灰等组成的基质中。基质使用前需高温消毒。移栽后要适当遮荫,可用塑料薄膜覆盖,保持较高空气湿度,温度维持在25℃左右,勿使阳光直晒。7~10天后要注意通风和补充浇水。20~40天,新梢开始生长后,小苗可转入正常管理。
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