杜鹃花植物组织技术(杜鹃花人工培植)
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李宗宪网友提问:
杜鹃花植物组织技术
优质答案:
杜鹃花植物组织技术一、杜鹃花组培的基本技术环节
杜鹃花组织培养,通常使用的外植体为茎尖、茎节和花蕾等。因花蕾的分化较为困难,周期长;茎尖的取材受到1定限制,故国内多采用茎节为初代培养的外植体。
杀菌处理时,杀菌能力较强的升汞(氯化汞)易造成外植体材料的褐变死亡,不适合使用。试验表白,采用饱和的次氯酸钙液上清液或五%的次氯酸钠液作为灭菌剂,效果较好,处理时间为一五至二零分钟。为加强灭菌效果,还可参加一%的克菌丹或零.一%的吐温-二零(山梨糖醇)配合使用。材料灭菌前的预处理,通常采用七零%酒精浸泡,不超过三零秒。此外,用中性洗涤剂进行材料的预处理,亦可有效降低其灭菌后的污染率。外植材料灭菌流程为:洗衣粉液浸泡二零分钟?流水冲洗至清?七零%酒精浸泡三零秒?灭菌水冲洗一分钟?五%次氯酸钠浸泡一五分钟,灭菌水漂洗三次,每次一分钟。如此,可将外植体污染率降低到一五%以下。
杜鹃花组培所用培养基,为Andeson改良MS培养基:将MS培养基中的硝酸铵和硝酸钾用量别离减至一/四,取消了碘化钾成分,铁盐的用量增加1倍。因杜鹃花科植物的原产地在高山酸性土壤,培养基的pH值宜为五.零至五.四。培养室温度二五℃,光照强度三零零零勒克斯,光照时间一二至一四小时。
杜鹃花在诱芽培养中使用的激素较1般植物有异,需要活性较强的细胞激动素类物质,才能达到满意的效果。试验表白,使用ZT的诱芽效应最为显著;添加KT的处理几乎无丛芽或侧芽发生,仅是原茎尖的伸长;而选用六-BA处理,则导致培养材料的褐变加剧,效果反不如对照。此外,在其后的增殖培养中,杜鹃花对细胞激动素种类的要求,仍以添加ZT为好。
国外在杜鹃花的组培中多使用二ip作为外源细胞激动素,效果较ZT好。但从经济的角度考虑,仍保举使用ZT。
二、杜鹃花的初代和继代增殖培养
杜鹃花初代诱芽培养,NAA浓度不得超过零.一mg/L,ZT用量的增大对诱芽效应有明显促进作用。但提高ZT浓度时,NAA浓度不适合同步增加,ZT/NAA值较大为好。从经济培养的意义出发,初代培养的激素配比以ZT五+NAA零.零一(mg/L)为宜,培养一个月摆布时,诱芽率即可达一零零%,诱芽系数六.五。
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